方法注意事项
患有类似疟疾的患者,并有去过当地流行地区的旅行史,应考虑巴贝西虫病巴贝西虫感染;然而,它很难诊断。虽然这些地区的怀疑指数应该很高,但巴贝斯虫病患者几乎没有(如果有的话)提示该病的局部症状。
各种直接和间接检测可能对诊断有用(见下文),尽管实验室研究的结果在无症状的个体中可能不显著。诊断的确认取决于寄生虫血症的程度以及实验室人员的专业知识和经验。 [4,6]美国传染病学会(IDSA)的指南建议用血液涂片或PCR对巴贝虫病进行确认性检测。 [3.]
血清细胞评价
应进行全血细胞计数(CBC)并进行鉴别检查。轻到严重的溶血性贫血、淋巴细胞减少和血小板减少是巴贝斯虫病的典型表现。 [3.]非典型淋巴细胞可能存在,如疟疾。不典型淋巴细胞的数量与寄生虫血症的程度或疾病的严重程度有关尚不清楚。 [37]
巴贝斯虫病患者还可观察到以下情况:
·白细胞总数变化。 [9]
·直接Coombs测试结果可能为阳性,也可能为阴性。 [11]
·患者血清触珠蛋白降低,网织红细胞计数升高。 [1]
外周血涂片
巴贝西虫病通常通过显微镜检查吉姆萨染色或赖特染色的薄或厚血涂片诊断。 [28]识别Babesiosis的能力取决于微生物学家或医生的专业知识和经验以及寄生症程度。审阅漏油下的200-300个字段增加了该测试的灵敏度,但没有标准的田间差异。 [3.]
外周血涂片赖特染色或吉姆萨染色显示红细胞内环状,中央呈苍白色。患者的染色涂片巴贝西虫感染,除了有这些红细胞内环状形式,也可能显示分裂子以类似马耳他杂交的四分体结构排列。四分体是巴贝斯虫病的特征。在无症状感染的个体中,涂片结果可能为阴性。
IDSA将巴贝斯虫病的高级别寄生虫血症定义为超过10%。 [3.]临床表现为巴贝斯虫病的患者通常有超过0.1%的寄生虫血症,尽管这种感染程度很难检测。 [11]寄生虫血症的程度与疾病的严重程度并不一定相关。
巴贝西虫可能会被误认为是疟疾寄生虫,尤其是环状的恶性疟原虫. [11]有帮助的特征巴贝西虫从疟原虫包括以下:
·缺乏褐色色素沉着(疟原虫素)
·缺乏同步阶段(分裂细胞和配子细胞疟原虫物种)
偶然出现四分体
此外,巴贝西虫在高水平的寄生虫血症患者中,形状和大小变化更大,可在红细胞外观察到。
厚涂片有时会增加敏感性,因为在厚涂片上看到的红细胞数量增加;然而,巴贝西虫由于生物体的大小,在薄涂片上可能更容易发现。重要的是要有在准备和审查这些涂片方面有经验的人员。 [3.]
血清化学
应测定血清肌酐以评估潜在的肾功能不全。血清肌酐和尿素氮(BUN)水平均可能升高 [9];然而,在将这些变化归因于其他原因之前,必须注意考虑急性肾损伤的其他原因巴贝西虫感染。
应获取肝酶以发现肝转氨酶水平升高(如天冬氨酸转氨酶[AST]和丙氨酸转氨酶[ALT])、碱性磷酸酶水平升高和高胆红素血症。这些异常在巴贝斯虫病患者中表现各异。 [9]
与疟疾一样,巴贝斯虫病可出现血清乳酸脱氢酶(LDH)升高。 [9]目前尚不清楚LDH水平的升高是否反映了寄生虫血症的程度或严重程度巴贝西虫感染。
血清学测试
间接immunofluorescent抗体
间接免疫荧光法测定免疫球蛋白M (IgM)或免疫球蛋白G (IgG)b . microti滴度可以帮助诊断巴贝斯虫病。然而,目前的IDSA指南建议用血液涂片或PCR进行巴贝斯虫病的确认性检测。 [3.].IgM滴度为1:64或更高通常被认为是阳性的,而1:32或更少的滴度可以表明先前感染。IgG.巴贝西虫滴度为1:10 0或更大时,通常提示活跃或近期感染。 [7]增加了四倍巴贝西虫从症状出现到症状缓解或改善时的IgG滴度可帮助确诊巴贝虫病。滴度越高并不意味着感染越严重。
值得注意的是血清学研究b . microti没有检测到其他物种的感染巴贝西虫(例如,发散B.,牛B., duncani,和gibsoni),因为抗原的差异。 [3.]如果对鼠巴贝虫病的检测结果为阴性,但对巴贝虫病的怀疑仍然很高,则考虑对患者去过的地区流行的其他毒株进行检测。
IFA为B。microti在88-96%的患者中检测出抗体b . microti感染。不管患者是否接受过治疗,这些抗体都可以持续超过一年。这使得急性巴贝斯虫病的诊断更加困难。如果病人是阳性的巴贝西虫PCR阴性和/或血液涂片阴性的IFA不推荐治疗,因为不太可能发生活动性感染。 [3.]
免疫印迹分析
巴贝斯虫病的免疫印迹检测是可用的,但不推荐用于常规诊断目的。 [3.]
酶联免疫吸附试验
采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对血供进行筛选巴贝西虫但在临床环境中并不经常使用。 [3.]
仓鼠接种
在巴贝斯虫病PCR检测发展之前,当外周血涂片和实验室结果不明确时,接种鼠(或沙鼠)可方便诊断。 [38]现在这主要是为了研究目的。怀疑b . microti将患者全血1 mL EDTA腹腔接种到仓鼠腹膜,对动物血液进行抗体分析,确诊感染。
这种测试的主要缺点是,动物必须在6-8周的时间内定期检查,这使得测试时间和劳动密集型,使其无法快速诊断。
聚合酶链反应分析
基于聚合酶链反应(PCR)的诊断分析提高了极低水平寄生虫血症的检出率。聚合酶链反应是目前推荐的诊断巴贝斯虫病的实验室检测方法之一,另一种检测方法是外周血涂片评价。 [3.]抗体滴度的持久性b . microti已被证明与用PCR检测巴贝斯动物DNA相关。 [39]在未经治疗的感染后长达27个月的时间里,已经报道了用PCR检测巴贝斯动物DNA。 [40]
与外周涂片评价和仓鼠接种相比,PCR检测具有更高的敏感性和同样的特异性。虽然它不能区分急性或活动性巴贝斯虫病和慢性巴贝斯虫病,但它在监测感染方面可能有用。特别是,PCR检测可用于帮助诊断复发巴贝西虫以前有过巴贝虫病或治疗效果可疑的患者的感染。
免疫功能低下的患者应进行监测巴贝西虫即使在无症状后,外周血涂片也有寄生虫血症。如果免疫缺陷患者继续出现症状,但他们的血液涂片呈阴性,考虑进行PCR检测。 [3.]
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外周涂片显示巴贝斯虫病。
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肩胛硬蜱,巴贝斯虫病的媒介蜱。图片由美国疾病控制和预防中心提供。
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血液涂片显示红细胞中有巴贝斯虫。图片由美国疾病控制和预防中心提供。
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巴贝虫种,四分体形成。图片由美国疾病控制和预防中心提供。